Adenovirová infekce skotu (adenoinfekce) je akutní onemocnění především telat. Vyznačuje se poškozením dýchacího systému, trávením a zánětem spojivek. U dospělých zvířat probíhá většinou latentně.
Nemoc je rozšířena v mnoha zemích světa, včetně Ruska. Telata ve věku od 2 týdnů do 4 měsíců častěji onemocní. Starší zvířata jsou postižena méně často.
Charakteristika budiče. Virus byl poprvé izolován Kleinem v roce 1939. (USA).
Virus patří do čeledi Adenoviridae, rodu Mastadenovirus. Viriony viru postrádají superkapsidovou skořápku, šestiúhelník kubické symetrie o průměru 70-90 nm. Každý virion se skládá z 252 kapsomer, z nichž 240 jsou hexony (kasomera obklopená šesti kapsomerami), 12 jsou pentony (kasomera obklopená pěti kapsomerami) a dlouhý proces se zahušťováním na vrcholu. Genom adenoviru obsahuje jednu lineární molekulu dvouřetězcové DNA.
Odolnost proti fyzikálním a chemickým vlivům. Viry ve vnějším prostředí (v pH 5,0-9,0) jsou odolnější než jiné viry: při 4 °C zůstávají aktivní 90 dní; při 24 °C – 1-3 měsíce; při 36 °C – 15-60 dní; při 50 °C jsou inaktivovány za 30-60 minut. Odolné vůči éteru, chloroformu, trypsinu, opakovanému zmrazování a rozmrazování, dlouhodobé skladování v lyofilizovaném stavu (více než 5 let). Absolutní ethylalkohol a formalín v konečné koncentraci 0,1-0,3 % inaktivují viry. UV paprsky je zcela inaktivují za 30-60 minut.
Antigenní struktura. Adenoviry mají tři typy antigenů: A, B a C.
Antigen A (spojený s hexony) je skupinově specifický, po imunizaci stimuluje tvorbu skupinově specifických protilátek fixujících komplement, precipitujících protilátek, protilátek, které reagují v reakci RNHA, a také protilátek neutralizujících virus proti homolognímu viru.
Antigen B (spojený s pentony) je toxický faktor zodpovědný za časný cytopatický účinek.
Antigen C (spojený s filamentózními strukturami virové kapsidy) je typově specifický, stimuluje produkci pouze typově specifických protilátek detekovaných v pH a RTGA.
V buněčné kultuře infikované onkogenními viry je detekován T (transplantační) antigen. Viry první podskupiny obsahují v genomu rodově specifický determinant společný savčím virům.
Antigenní variabilita. U skotu bylo identifikováno 10 sérotypů adenoviru. Všech 10 typů bovinních adenovirů je rozděleno do dvou podskupin na základě společných antigenů fixujících komplement a precipitujících antigenů detekovaných v CSC, RDP a RIF. První podskupina zahrnuje sérotypy 1, 2 a 3, zbývající typy patří do druhé podskupiny. Viry první podskupiny jsou antigenními a biologickými vlastnostmi blíže lidským adenovirům.
Antigenní aktivita. Virus indukuje v těle zvířat tvorbu protilátek neutralizujících virus, fixujících komplement a precipitujících protilátek.
Kultivace virů. Pro kultivaci bovinních adenovirů se používají buněčné kultury z tkání těchto zvířat: bovinní embryonální ledviny (PEC), bovinní varlata (TB), bovinní embryonální plíce (LEK). Viry vyvolávají v buňkách charakteristický cytopatický efekt (zakulacení buněk a tvorba shluků z nich).
Bovinní adenoviry se nemnoží v kuřecích embryích a jsou pro laboratorní zvířata nepatogenní, s výjimkou některých onkogenních kmenů (3 sérotypy), které způsobují nádory u novorozených křečků.
Viry první podskupiny se dobře reprodukují v buněčné kultuře PEC, LEC a TB s tvorbou jedné jaderné inkluze nepravidelného kulatého tvaru v nich.
Pro viry druhé podskupiny se používá kultura buněk TB nebo LEK, ve kterých produkují mnohočetné intranukleární inkluze správného zaobleného tvaru.
V posledních letech byla pro kultivaci adenovirů první a druhé podskupiny navržena kontinuální kultivace buněk telecích ledvin T-1 (Taurus-1).
Hemaglutinační vlastnosti. Hemaglutinační aktivita byla prokázána u adenovirů první podskupiny ve vztahu k erytrocytům bílých potkanů a v nízkých titrech – erytrocytech bílých myší. Některé kmeny virů druhé podskupiny získaly po předběžné koncentraci hemaglutinační vlastnosti. Přesnější výsledky PTA se získají při teplotě 4 °C. Spektrum hemaglutinační aktivity mnoha kmenů adenovirů nebylo dosud studováno.
Hemadsorpční vlastnosti. Není instalován.
Onkogenní vlastnosti. Nachází se v kmeni WBR-1 pro novorozené křečky.
experimentální infekce. Reprodukováno pouze na telatech ve věku 15-30 dní, lépe na bezmlezivových. U starších zvířat je onemocnění chronické.
Klinické příznaky. Inkubační doba onemocnění trvá 4-7 dní. Průběh onemocnění závisí na podmínkách krmení, údržbě, věku telat. Nejakutněji se vyskytuje u mladých zvířat ve věku 5-20 dnů, doprovázeno zvýšením tělesné teploty na 41,5°C, slzením, hlenovitými, následně hlenotvornými výtokem, kašlem, dušností. U telat je pozorována slabost, průjem, někdy s příměsí krve ve výkalech. Úmrtnost může dosáhnout 60 %. U starších zvířat se onemocnění často stává chronickým. Nemocná telata jsou zakrnělá a dlouhodobě kašlou. Adenovirová infekce je tedy charakterizována převahou respiračního, spojivkového nebo střevního syndromu.
Patologické změny. Při pitvě jsou zjištěny známky katarálně-hemoragické gastroenteritidy, změny v dýchacích orgánech (ložiskové uzávěry, atelektáza a emfyzém). Regionální lymfatické uzliny jsou zvětšené. V buňkách plicní tkáně, sliznicích průdušnice, průdušek, střev a parenchymálních orgánů se nacházejí intranukleární inkluze.
Lokalizace viru. Z klinicky nemocných zvířat se adenoviry izolují ze vzorků spojivek, nosní dutiny, mandlí, z krve a stolice, dále z parenchymálních orgánů a lymfatických uzlin mrtvých telat. Zvířata, která jsou dlouhodobě nemocná, zůstávají nosiči viru. Charakteristickou biologickou vlastností adenovirů je tropismus pro lymfoidní tkáň.
Zdroje infekce. Hlavním zdrojem adenovirové infekce jsou nemocná zvířata, která vylučují virus do prostředí výtokem z nosu a stolicí, a také nosiči viru. K infekci dochází vzduchem, alimentárně a spojivkou. Přenos infekce je možný krmivem, podestýlkou, kontaminovanou sekrety nemocných zvířat.
diagnostika. Diagnóza je stanovena na základě analýzy epizootologických, klinických dat, patologických změn a laboratorních výsledků. V tomto případě jsou rozhodující laboratorní studie, protože PG-3 viry, infekční rinotracheitida, průjem, respirační syncytiální infekce, stejně jako chlamydie a další agens mohou způsobit podobnou patologii. Přijatý materiál je proto v laboratoři paralelně vyšetřován na všechny výše uvedené infekce pomocí diagnostických souprav vyráběných biologickým průmyslem.
Sběr a příprava materiálu. Paralogický materiál se do laboratoře zasílá od nemocných zvířat odebraných první den nemoci s výrazným klinickým obrazem nebo ze zvířat usmrcených pro diagnostické účely v akutním stadiu nemoci.
Nemocným zvířatům se odebírají výtěry ze sliznic nosu, očí a konečníku pomocí sterilní vatové gázy nebo pěnové gumy; krev v prvních 3 dnech nemoci (od alespoň 10 zvířat) a o 3 týdny později od stejných zvířat (k získání párových sér).
Ze zvířat usmrcených pro diagnostické účely odeberte kousky plic, sleziny, sliznice nosní dutiny, průdušnice, střeva, regionální lymfatické uzliny.
Kusy orgánů o hmotnosti do 20 g se umístí do sterilních misek (zkumavky nebo penicilinové lahvičky s pryžovými zátkami); vatové tampony (výplachy) – v lahvičkách s Hankovým roztokem nebo fyziologickým roztokem. Materiál v termosce s chladící směsí a průvodním dopisem je do laboratoře doručen kurýrem.
V laboratoři se lahvičky s tampony 2-3 minuty protřepávají, vymačkávají a vyjmou a obsah lahviček se odstředí. Supernatant se použije k izolaci viru, z buněčného sedimentu se vytvoří nátěry pro RIF.
Z kousků orgánů usmrceného zvířete se připravují stěry-otisky pro RIF a 10% suspenze viru pro jeho izolaci.
Laboratorní diagnostika. Indikace viru. V patologickém materiálu se provádí průkazem virového antigenu v sérologických reakcích: RIF, ELISA, RSK, RDP. K tomuto účelu RIF využívá fluorescenční protilátky (z diagnostických souprav) proti virům PG-3, VD, IRT, PC, adenovirům první a druhé podskupiny. Navíc pro indikaci adenovirů jsou někdy detekována intranukleární inkluzní tělíska v nátěrech-otiscích, jejichž detekce je orientovaná.
K detekci virové nukleové kyseliny ve výtěrech a stolici se používá DNA sonda a vyvíjí se PCR.
Izolace virů. Izolace viru se provádí v primárních trypsinizovaných buněčných kulturách embryí skotu (ledviny, plíce) a býčích varlat. V posledních letech se častěji používají transplantované buněčné linie (ledviny, plíce), viry se poměrně úspěšně izolují na kultuře transplantovaných telecích ledvin (T-1) a virus průjmu se izoluje na epitelu koronárních cév telete. (CST). Infikované a kontrolní buněčné kultury se inkubují při 37-38 °C po dobu až 7-14 dnů, denně se sledují pod mikroskopem, aby se detekovaly cytopatické účinky. Specifické změny v buňkách infikovaných adenoviry začínají na periferii monovrstvy, která se láme, buňky se zaoblují a shlukují do konglomerátů, podobných hroznům. Cytopatický účinek je doprovázen tvorbou intranukleárních inkluzí.
Izolát je považován za izolovaný, pokud způsobuje stabilní, jednotný CPP v alespoň třech po sobě jdoucích pasážích. V tomto případě je možná jeho sekvenční identifikace. V nepřítomnosti CPD ve třech pasážích se provádí čtvrtá pasáž s pokusem detekovat virus v monovrstvé buněčné kultuře na krycích sklíčkách metodou RIF. Pokud je reakce negativní, izolace virů se zastaví.
Izolace virů u přirozeně vnímavých laboratorních zvířat a embryí kuřat se nepoužívá.
Identifikace izolovaného viru. Provádí se v sérologických reakcích: RIF, RSK, RDP, PH, RTGA. Nejčastěji se RIF používá se dvěma fluorescenčními séry odpovídajícími dvěma podskupinám (první a druhé). Typizace adenovirů se provádí ve výzkumných institucích, které mají typově specifická séra a viry 10 typů adenovirů. Pro tento účel se používá PH, a pokud má izolovaný virus hemaglutinační aktivitu, provádí se RTGA podle obecně uznávaných metod.
Retrospektivní diagnostika. Provádí se za účelem detekce specifických protilátek v krevním séru získaných zvířat v RNGA, ELISA, nepřímé RIF. RSK a RDP pomocí párových krevních sér odebraných v prvních 2-3 dnech nemoci a po 2-4 týdnech. Diagnostický význam má detekce 4násobného nebo většího zvýšení titru protilátek v druhém séru nemocného zvířete a zvýšení jeho pozitivních vzorků.
Diferenciální diagnostika. Na základě epizootologických, klinických údajů a patoanatomických změn je obtížné stanovit přesnou diagnózu adenovirové infekce kvůli její podobnosti s parainfluenzou-3, virovým průjmem, infekční rhinotracheitidou, respirační syncytiální infekcí, chlamydiemi a dalšími onemocněními, která postihují dýchací a střevní trakt zvířat. Adenovirová infekce se navíc velmi často vyskytuje v souvislosti s výše uvedenými onemocněními. Ke správné diagnóze proto pomohou pouze laboratorní studie provedené pomocí diagnostických souprav pro tato onemocnění.
Imunita a specifická profylaxe. Otázky imunity u adenovirové infekce nebyly dostatečně prozkoumány. To je zjevně způsobeno mnoha typy patogenů a latentním průběhem samotné infekce u dospělých zvířat. Bylo zjištěno, že zotavená a vakcinovaná telata získávají imunitu vůči infekci virem homologního typu a viry patřícími do podobné antigenní podskupiny. Pasivní imunitu vytvářejí protilátky z kolostra během 2–2,5 měsíce. Vysoce účinné jsou sekreční protilátky sliznice dýchacích cest.
U nás se používá inaktivovaná dimerethylenaerosilová vakcína z kmenů dvou podskupin bovinních adenovirů a dále bivalentní vakcína obsahující adenoviry dvou podskupin a původce pasteurelózy. U vakcinovaných krav přetrvával titr protilátek v krvi proti dostatečně vysoké chřipce 6 měsíců po otelení, u vakcinovaných telat – více než 4,5 měsíce.
Adenovirová infekce skotu (adenovirová pneumonie telat, adenovirová pneumoenteritida telat) (infekce adenoviridae) je akutní onemocnění mladých hospodářských zvířat, charakterizované poškozením dýchací, trávicí, lymfoidní tkáně, zánětem spojivek. Skot často nese latentní adenoviry, které způsobují asymptomatické infekce.
Etiologie. Původcem adenovirové infekce je DNA genomový virus patřící do čeledi Adenoviridae, rodu Mastadenovirus. Částice viru mají tvar dvacetistěnu, velikost je od 73 do 87 nm, neexistuje žádná superkapsida. V současné době je známo 32 typů lidských adenovirů, 25 typů – skot, 4 typy – ovce, 2 typy adenovirů psů a myší, 8 typů kuřat.
Kmeny adenovirů skotu 1., 2. a 3. sérotypu mají společný antigen fixující komplement, který se liší od antigenu typů 4, 5, 6. Na základě těchto vlastností jsou adenoviry k.r.s. rozděleny do 2 antigenních podskupin. Adenoviry první podskupiny jsou biologickými vlastnostmi bližší lidským adenovirům. Některé sérotypy adenovirů mají onkogenní vlastnosti.
Adenoviry v závislosti na sérotypu způsobují hemaglutinaci erytrocytů bílých potkanů (1. a 2. sérotyp), bílých myší (2. sérotyp) a opic.
epidemiologická data. V přirozených podmínkách jsou častěji infikována adenovirovou infekcí telata ve věku od 2 týdnů do 4 měsíců, dále selata, jehňata, kuřata, hříbata, štěňata psů, lišky, polární lišky. Prokázaná přecitlivělost na adenovirovou infekci u hříbat arabských plemen.
Zdrojem infekčního agens jsou nemocná zvířata, která vylučují virus výtokem z nosu a stolicí. K infekci dochází aerogenními a alimentárními cestami, přes spojivku očí, přímým kontaktem. Přenosové faktory jsou kontaminovány výměšky nemocných zvířat, potravou, vodou, vzduchem, podestýlkou, inventářem atd.
U dospělých zvířat probíhá adenovirová infekce latentně, doprovázená dlouhým nosičem viru. U mladých zvířat se onemocnění projevuje sporadicky nebo formou enzootických vzplanutí. U telat a selat se toto onemocnění může změnit v devastující epizootiku s akutním průběhem, masivním zápalem plic a vysokou mortalitou. Byly zaznamenány případy komplikací adenovirové infekce mykoplazmaty, bakteriální mikroflórou a jinými viry.
Byl zaznamenán vztah mezi průběhem adenovirové infekce u skotu a leukémií. Při vyšetřování krav z chovů nepříznivých pro leukémii bylo zjištěno, že séropozitivní krávy jsou 100% infikovány adenoviry.
Průběh a příznaky. Inkubační doba telat je 3-4 dny. Průběh onemocnění u mladých zvířat je akutní, ve vyšším věku je možný a chronický.
U telat teplota stoupá až na 41,5°C, objevuje se odmítání potravy, nejprve serózní a poté hlenohnisavý výtok z nosu, slzení, kašel, dušnost a průjem.
Onemocnění je zvláště závažné u telat ve věku 15-20 dnů, u kterých je zjištěn průjem s příměsí krve a hlenu, těžké deprese, dehydratace organismu a úhyn 50-60 % pacientů v 1-3 dny nemoci. U starších telat je zaznamenán kašel, průjem, vyhublost, zakrnělý růst a vývoj.
Diagnóza o adenovirové infekci dát do komplexu na základě klinických a epizootologických údajů, patologických změn a laboratorních testů. Laboratorní diagnostika adenovirové infekce zahrnuje následující studie: průkaz specifického antigenu z biologického materiálu pomocí enzymové imunoanalýzy (ELISA) nebo imunofluorescence (MFA), izolace viru v buněčné kultuře a jeho identifikace v neutralizačních reakcích (RN) a inhibice nepřímé hemaglutinace (RTNGA). Patří sem také reakce fixace komplementu (RCC), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), stejně jako retrospektivní diagnóza pomocí nepřímého hemaglutinačního testu (RNHA), enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), neutralizace (RN), vazba komplementu (RCC).
diferenciální diagnostika. Adenovirová infekce se odlišuje od infekční rinotracheitidy, respirační syncytiální infekce, virového průjmu, parainfluenzy-3, chlamydií, pasteurelózy.
Léčba. K léčbě se používají hyperimunní séra a séra rekonvalescentů, ve kterých jsou protilátky proti adenoviru současně s antibakteriálními a imunostimulačními léky. Používá se také symptomatická léčba.
Preventivní a kontrolní opatření. Pro specifickou profylaxi se používají inaktivované monovakcíny, hyperimunní séra. K likvidaci onemocnění se používají obecná protiepizootická opatření – omezení pohybu hospodářských zvířat, dezinfekce, karanténa nemocných zvířat.
Copyright © 2009
Při použití materiálů webu je odkaz –
Moskevské veterinární WEB-Centrum je povinné.
